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微生物菌種活化就是將保藏狀態的菌種放入適宜的培養基中培養，逐級擴大培養是為了得到純而壯的培養物，即獲得活力旺盛的、接種數量足夠的培養物。菌種發酵有一般需要2-3代的復壯過程，因為保存時的條件往往和培養時的條件不相同，所以要活化,讓菌種逐漸適應培養環境。菌種活化是指將長期保存的菌種恢復到具有生長活力的狀態，以便于進一步的培養和使用。根據菌種的保存方式，活化方法可以分為以下幾種：
1. 凍干粉或載體保存形式的活化：
首先，將凍干粉或載體保存的菌株加入少量生理鹽水或非選擇性肉湯培養基中進行溶解懸浮。
使用劃線或涂布方式接種至平板，或吸取菌液至液體培養基中進行培養。
2. 甘油凍存或液體保存形式的活化：
在室溫下快速融化，然后進行劃線或涂布接種至平板，或直接加入到液體培養基中進行培養。
3. 瓷珠形式的活化：
挑取單個瓷珠在平板上滾動數次或直接加入到液體培養基中進行培養。
4. 斜面或半固體形式的活化：
直接挑取菌苔轉接至平板或液體培養基中進行培養。
5. 具體操作步驟：
準備培養基：根據菌種類型選擇合適的培養基，如胰酪大豆胨液體/瓊脂培養基、營養肉湯/瓊脂培養基等。
活化過程：
1) 第一代活化：從凍存管或斜面挑取菌種，接種至固體斜面或液體培養基，在適宜溫度下靜置培養（如細菌37℃, 24小時）。
2) 擴大培養：將活化的菌液按1%5%接種量轉移至新鮮液體培養基，搖床振蕩培養至對數生長期。
注意事項：嚴格無菌操作，超凈臺酒精燈旁接種；若菌株生長緩慢，可延長培養時間或添加特定生長因子。
6. 復蘇凍干菌株：
開啟產品包裝：先用70%酒精棉擦拭外包裝，再打開使用。
復活：選擇合適的培養基和培養條件進行復活，第1次活化最好在非選擇性瓊脂培養基上進行。
傳代次數：凍干菌株的傳代次數不得超過5代。
7. 工作菌株確認：
1）、使用無菌接種環在相應的培養基平板上劃線分離單個菌落，置適宜條件下培養。
2）、觀察菌落狀態，挑取單一純菌落，進行革蘭染色、鏡檢，確認菌種。
通過這些方法，可以有效地活化并復蘇微生物菌種，確保其在后續實驗中的活力和純度。
