產品簡介：
產品名稱：總黃酮(TF)試劑盒說明書
規格：48樣 96樣
貨號：AS020
檢測方法：可見分光光度法 微板法
產品分類：氧化應激系列
貯存溫度：2～8℃。
本試劑盒保質期：6個月。本產品僅用于科研實驗。
試劑的組成和配制：
提取液：液體 100mL×1 瓶，4℃保存；
試劑一：液體 5mL×1 瓶，4℃保存；
試劑二：液體 200μL×1 支，4℃保存；
試劑三：液體 4mL×1 瓶，4℃保存；
試劑四：粉劑×2 瓶，4℃保存。
所需的儀器和用品：
可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿（光徑 1cm）、低溫離心機、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶（SOD）的測定：
建議正式實驗前選取 2 個樣本做預測定，了解本批樣品情況，熟悉實驗流程，避免實驗
樣本和試劑浪費！
1、樣本制備
① 組織樣本：
取約 0.1g 組織（水分充足的樣本可取 0.25g），加入 1mL 提取液，在 4oC 或冰浴進行
勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min，取上清作為待測液。
【注】：若增加樣本量，可按照組織質量（g）：提取液體積(mL)為 1：5~10 的比例進行提取
② 細菌/細胞樣本：
先收集細菌或細胞到離心管內，離心后棄上清；取約 500 萬細菌或細胞加入 1mL
提取液，超聲波破碎細菌或細胞（冰浴，功率 200W，超聲 3s，間隔 10s，重復 30 次）；
12000rpm 4℃離心 10min，取上清，置冰上待測。
【注】：若增加樣本量，可按照細菌/細胞數量（10
4）：提取液（mL）為 500~1000：1 的比例進行提取。 ③ 液體樣本：直接檢測；若渾濁，離心后取上清檢測。
Glucagon 抗體 規格: 0.1ml
PGF2 α 前列F2a抗體 規格: 0.2mlalpha 2 Macroglobulin α2巨球(α-2M)抗體 規格: 0.2ml
IL-6R Beta/CD130/gp130 白細胞介6受體β抗體IL-6Rβ 規格: 0.1ml
Rabbit Anti-chicken IgG/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標記的兔抗雞IgG 規格: 0.1ml
phospho-MEF2D(Ser444) 磷化肌細胞特異性增強因子2D抗體 規格: 0.1ml
MAP1A 微管相關1A抗體 規格: 0.1ml
Vitamin D Binding protein D結合抗體 規格: 0.2ml
E-cadherin/CD324 上皮鈣粘附分子抗體 規格: 0.1ml
CDC42 細胞分化周期CDC42抗體 規格: 0.1ml
CGR19 細胞生調控19抗體（環指197） 規格: 0.2ml
PCDHA3 原鈣粘附α3抗體 規格: 0.2mlMouse Anti-human IgG/HRP 辣根過氧化物標記的小鼠抗人IgG 規格: 0.1ml
總黃酮(TF)試劑盒說明書3934-84-73-O-甲基沒食子 規格： 20mg
泛影 規格： 100mg
20736-09-8柴胡皂a 規格： 20mg
464-92-6積雪草 規格： HPLC≥98%，20mg/vial
470-17-7異土木香內酯 規格： 20mg
腐胺 規格： HPLC≥98%;20mg
千里光對照藥材 規格： 1g
153719-23-4噻嗪;純品型;標準品;有證書 規格： 0.1g
4684-32-6鴨腳樹葉 規格： HPLC≥98%;20mg
枇杷葉 規格： 1g
操作步驟:
實驗開始前，各試劑均應平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時，均需混勻，混勻時盡量避免起泡。實驗前應預測樣品含量，如樣品濃度過高時，應對樣品進行稀釋，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍，計算時再乘以相應的稀釋倍數。
1. 加樣：分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl，余孔分別加標準品或待測樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，酶標板加上蓋或覆膜，37℃反應120分鐘。為保證實驗結果有效性，每次實驗請使用新的標準品溶液。
2. 棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl（在使用前一小時內配制），酶標板加上覆膜, 37℃反應60分鐘。
3. 溫育60分鐘后，棄去孔內液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內液體拍干）。
4. 每孔加檢測溶液B工作液（同檢測A工作液） 100μl，酶標板加上覆膜37℃反應60分鐘。
5. 溫育60分鐘后，棄去孔內液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內液體拍干）。
6. 依序每孔加底物溶液90μl，酶標板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內，此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。
7. 依序每孔加終止溶液50μl，終止反應，此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性，底物反應時間到后應盡快加入終止液。
8. 用酶聯儀在450nm波長依序測量各孔的光密度（OD值）。在加終止液后立即進行檢測。
